国内刊号:44-1500/P
国际刊号:1009-5470
发布日期:
作者:武慧宇, 高秀菊, 葛东振, 朱军, 邹潇潇, 黄惠琴, 顾志峰, 鲍时翔
单位:1. 海南大学海洋学院, 海南 海口 570228;2. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/海南热带农业资源研究院海南省热带农业资源保护与利用重点实验室, 海南 海口 571101;3. 中国热带农业科学院湛江实验站, 广东 湛江 524013;4. 海南省海洋生物功能性成分研究与利用重点实验室, 海南 海口 571101
关键词:方斑东风螺,养殖,越南蔷薇菌,蛋白酶,培养基优化,
基金:农业农村部财政专项(NFZX2021); 农业农村部财政专项(NHYYSWZZZYKZX2020); 中央级公益性科研院所基金项目(1630052019014)
方斑东风螺是我国及东南亚地区重要的海水养殖品种, 由于养殖底质污染, 导致方斑东风螺病害频发。文章从健康方斑东风螺养殖池底沙中筛选蛋白酶高产菌株, 基于形态、生理生化和分子特征对高产蛋白酶菌株进行鉴定, 通过菌株溶血性检测和药敏试验初步评价其安全性, 在单因素试验的基础上通过正交试验对其发酵培养基碳源、氮源及金属盐进行优化, 并在室内养殖条件下考察了其对方斑东风螺养殖水体(氨氮、亚硝酸盐氮、化学需氧量)、底沙(总氮、有机碳)以及方斑东风螺生长(存活率、特定生长率)的影响。结果表明: 从健康方斑东风螺养殖池底沙分离得到一株高产蛋白酶芽孢菌, 其蛋白酶活性为324.0U·mL-1, 命名为YZS02, 经鉴定菌株YZS02为越南蔷薇菌(Rossellomorea vietnamensis), 该菌株没有溶血活性, 对24种抗生素敏感, 其最优发酵培养基为酵母粉15g·L-1、可溶性淀粉20g·L-1、MgCl2 8g·L-1、NaCl 30g·L-1, 用此优化培养基在30℃, 200r·min-1条件下摇瓶发酵24h, 菌体密度可达到7.19×109个·毫升-1, 该密度是优化前的2.89倍, 同时优化后蛋白酶活性可达753.3U·mL-1, 为原来的2.3倍。YZS02能够有效降低方斑东风螺养殖水体氨氮和化学需氧量水平, 对底沙中的总氮也有很好的去除效果, 试验结束时对照组水体氨氮浓度为2.33mg·L-1、化学需氧量为278.37mg·L-1、底沙总氮含量为538.31μg·g-1, 而试验组水体氨氮浓度为0.78 mg·L-1、化学需氧量为128.47mg·L-1、底沙总氮含量为128.71μg·g-1。YZS02还能有效提高方斑东风螺的存活率及特定生长率。
来源:2023年第5期
《热带海洋学报》期刊编辑部